A coloração de Gram é a mais usada nos exames microbiológicos. Sobre ela podemos afirmar:
as bactérias gram-positivas possuem uma parede fina de peptidoglicano e pequena quantidade de ácido teicóico
quanto mais espessa é a parede bacteriana formada de peptidoglicano e ácido teicóico, mais retém o cristal violeta
a descoloração do cristal violeta é feita através do álcool-ácido
a última etapa do método é cobrir o esfregaço com lugol, que serve como mordente
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